Identificazione rapida dell’influenza A mediante tecnica ELISA

Chemical laboratory wareL’influenza è causata dal virus omonimo, il quale può causare una morbilità significativa e rende il nostro corpo vulnerabile a sovrainfezioni, tale per cui la diagnosi precoce della malattia virale è essenziale. Anche se sono disponibili test diagnostici immunologici, essi hanno una bassa sensibilità e riproducibilità. Spasic e colleghi hanno valutato la prospettiva di rilevare il virus influenzale A mediante test ELISA digitale. Per selezionare in modo appropriato i biorecettori per questo saggio biologico, sono stati metodicamente testati per la loro reattività e affinità di legame sette anticorpi nucleoproteici commerciali contro l’influenza A. Lo studio è stato eseguito mediante due piattaforme analitiche differenti, ossia un saggio di immunoassorbimento enzimatico e un sistema a risonanza plasmonica superficiale. Gli anticorpi selezionati hanno mostrato un comportamento completamente differente sulle due piattaforme in funzione dei vari dosaggi studiati. Sorprendentemente, gli anticorpi che hanno mostrato buona reattività complessiva su entrambe le piattaforme hanno la più alta costante di dissociazione tra gli anticorpi testati, suggerendo che, anche se importante, l’affinità di legame non è l’unico parametro da considerare quando si selezionano anticorpi per applicazioni analitiche. L’ anticorpo dotato di migliore sensibilità è stato implementato su una piattaforma ELISA digitale sviluppata per il rilevamento ultrasensibile della nucleoproteina ricombinante, raggiungendo un limite di rilevazione dell’ordine delle femtomoli per litro (FM) in estratti di tamponi nasofaringei; ciò rende il test paragonabile alle tecniche di rilevazione molecolare attualmente disponibili, pur con una velocità di esecuzione del test maggiore a favore del metodo proposto da Spasic.

Leirs, P. T. Kumar, D. Decrop, E. Pérez-Ruiz, P. Leblebici, B. Van Kelst, G. Compernolle, H. Meeuws, L. Van Wesenbeeck, O. Lagatie, L. Stuyver, A. Gils, J. Lammertyn, D. Spasic. Bioassay Development for Ultrasensitive Detection of Influenza A Nucleoprotein Using Digital ELISA. Anal. Chem. 88 (17), 8450–8458, 2016

di D. Merli

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