Saggio di citotossicità in vitro per il test di tossicità orale acuta: performance e limiti

Ottenere informazioni sulla tossicità potenziale delle sostanze chimiche una volta ingerite per via orale – la cosiddetta tossicità orale acuta – è di fondamentale importanza: secondo la legislazione chimica della UE (REACH), questo è uno dei due effetti per la salute (assieme alla sensibilizzazione cutanea) che ancora richiedono test su animali quando le sostanze testate sono prodotte a bassi livelli. Finora la tossicità orale acuta è stata verificata con una serie di test di «refinement» condotti in ratti e basati sulla letalità delle sostanze. Questa procedura potrebbe però definitivamente cambiare perché lo scorso maggio il Laboratorio di Riferimento Europeo ECVAM ha pubblicato le sue raccomandazioni sulla validità e l’applicabilità del saggio di citotossicità in vitro basato sul test del Rosso Neutro in cellule 3T3 per testare la tossicità orale acuta. Il test del Rosso Neutro (NRU, Neutral Red Uptake) è un saggio di citotossicità che utilizza fibroblasti murini BALB/c 3T3 per misurare la riduzione concentrazione-dipendente dell’accumulo del colorante rosso neutro (NR) nelle cellule dopo esposizione a una sostanza test, in presenza o in assenza di luce UVA. Alterazioni della membrana cellulare causate dall’eventuale tossicità della sostanza test sono irreversibili e determinano la perdita del NR dall’interno della cellula in cui si era accumulato ed era trattenuto prima dell’aggiunta della sostanza in questione. Il metodo permette l’identificazione di sostanze chimiche che non richiedono la classificazione come intossicanti (le cosiddette sostanze «negative») e risulta utile specificamente per i prodotti chimici industriali nell’ambito del REACH. Le raccomandazioni dell’EURL ECVAM riassumono la performance complessiva del metodo test 3T3 NRU, la sua applicabilità e le sue limitazioni, dando indicazioni per il suo uso scientifico corretto.
http://ihcp.jrc.ec.europa.eu/our_labs/eurl-ecvam/eurl-ecvam-publishes-its-recommendation-on-an-in-vitro-cytotoxicity-assay-for-acute-oral-toxicity-testing 

 

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