Saggio multiplex PCR: quattro funghi micotossigeni

Uno studio indiano ha sviluppato e valutato un saggio di multiplex PCR (mPCR) per la rivelazione contemporanea di quattro geni di pathway di micotossine: nor1 (aflatossina), Tri6 (tricotecene), FUM13 (fumonisina) e otanps (ocratossina A). I ricercatori hanno ottimizzato e validato un saggio mPCR con controlli competitivi interni di amplificazione, che utilizza primer specifici per ognuno dei quattro geni citati, usando 10 ceppi di riferimento e 60 isolati da colture pure. Il saggio ha permesso di rivelare tutti e quattro i geni di micotossine in campioni di mais artificialmente contaminati con una sensibilità di 2 × 103 ufc g−1 per i ceppi Aspergillus nor1positivi, e per i ceppi Fusarium Tri6 e FUM13-positivi, mentre per i ceppi Penicillium otanpspositivi la sensibilità era 2 × 104 ufc g−1. Quando il saggio è stato applicato a 40 alimenti naturali, il 35% dei campioni è risultato contaminato da una o più micotossine. I risultati mPCR sono stati confermati mediante cromatografia liquida ad alte prestazioni (high-performance liquid chromatography, HPLC). Il saggio mPCR sviluppato è quindi una tecnica rapida e affidabile per la contemporanea rivelazione, specifica e sensibile, di ceppi Aspergillus aflatossinogenici, di ceppi Fusarium produttori di tricotecene e fumonisina, e di specie Penicillium ocratossinogeniche da alimenti naturalmente contaminati. Questo saggio molecolare potrebbe rappresentare una strategia di supporto alle tecniche convenzionalmente usate per l’analisi di micotossine quali HPLC, cromatografia su strato sottile (thin-layer chromatography, TLC) e HPLC-TLC, permettendo il monitoraggio high-throughput dei principali funghi micotossinogeni durante la produzione alimentare.

di S.Guenzi

Informazioni sull'autore
Condividi quest’articolo
Invia il tuo commento

Per favore inserisci il tuo nome

Inserisci il tuo nome

Per favore inserisci un indirizzo e-mail valido

Inserisci un indirizzo e-mail

Per favore inserisci il tuo messaggio

Laboratorio © 2017 Tutti i diritti riservati